Bạn cũng có thể khử muối mẫu của mình bằng cách siêu lọc đến 1/10 thể tích trước đó, pha loãng một lần nữa và lặp lại bước UF. Phương pháp tốt nhất để khử muối làkhử muối bằng cách lọc gel chống lại 50 mM đệm, hơn là siêu lọc (cổ điển, không ly tâm).
Quá trình khử muối trong thanh lọc protein là gì?
Quá trình khử muối được sử dụngđể loại bỏ muối khỏi dung dịch protein, phenol hoặc các nucleotide chưa liên kết từ axit nucleic hoặc thuốc thử liên kết chéo hoặc dán nhãn dư thừa từ các protein liên hợp.
Bạn thanh lọc protein bằng cách nào?
Trong tinh chế protein số lượng lớn, bước đầu tiên phổ biến để phân lập protein là kết tủa với amoni sulfat (NH4)2SO4. Điều này được thực hiện bằng cách thêm lượng amoni sulfat ngày càng tăng và thu thập các phần khác nhau của protein kết tủa. Sau đó, amoni sulfat có thể được loại bỏ bằng thẩm phân.
Bạn đệm protein trao đổi như thế nào?
Trao đổi bộ đệm, tuy nhiên, được thực hiện bằng cáchcân bằng đầu tiênvới nhựa cột với bộ đệm mà mẫu sẽ kết thúc. Trong cả hai trường hợp, thành phần đệm mang mẫu vào cột sẽ được thay thế bằng giải pháp mà cột đã được cân bằng trước.
Kỹ thuật sắc ký nào sau đây có thể được áp dụng để khử muối cho protein?
Như đã đề cập ở trên,lọc gelcó thể được sử dụng hiệu quả cho proteinkhử muối và được thực hiện bằng cách cho nước cân bằng cột lọc gel. Tuy nhiên, việc trao đổi bộ đệm được thực hiện bằng cách cân bằng nhựa cột trước tiên với bộ đệm đích.
