Trong những năm qua, Coriell đã sử dụng tất cả huyết thanh bất hoạt nhiệt để nuôi cấy tế bào của mình để bất hoạt protein bổ sung có trong huyết thanh bê sơ sinh. Vì chúng tôi đã đổi sang huyết thanh bò thai nên chúng tôi thấy rằng việc khử hoạt tính bằng nhiệt làkhông cần thiếtđối với hầu hết các dòng tế bào.
Bạn làm nóng FBS sẽ vô hiệu hóa trong bao lâu?
Quy trình sau đây được đề xuất để khử hoạt tính bằng nhiệt của huyết thanh bò thai (FBS). FBS được làm nóng đến 56 ± 2 ° C trong30 ± 2 phúttrong nồi cách thủy đang khuấy. Ngừng hoạt động bằng nhiệt (HI) - một quá trình mà FBS được duy trì ở nhiệt độ 56 ± 2 ° trong 30 ± 2 phút.
Tại sao FBS cần phải khử hoạt tính bằng nhiệt trước khi sử dụng?
Cách xử lý phổ biến của FBS là khử hoạt tính bằng nhiệt, trong đó FBS được đun nóng ở 56 ° C trong 30 phút trong nồi cách thủy và thỉnh thoảng lắc. Mục đích làđể vô hiệu hóa bất kỳ thành phần nào của hệ thống bổ thể có trong FBS[24] và các chất ức chế tiềm ẩn khác đối với sự phát triển của tế bào.
Tại sao bạn cần đun nóng serum khử hoạt tính?
Mục tiêu của việc khử hoạt tính bằng nhiệt làđể phá hủy hoạt động bổ sung trong huyết thanh mà không ảnh hưởng đến các đặc tính thúc đẩy tăng trưởng của sản phẩm. Việc loại bỏ hoạt động của bổ thể khỏi huyết thanh là không cần thiết đối với hầu hết các dịch vụ nuôi cấy tế bào, nhưng có thể cần thiết đối với các nền văn hóa nhạy cảm với hoạt động của bổ thể.
Làm thế nào để bạn lưu trữ FBS bất hoạt do nhiệt?
Bảo vệ FBS đã rã đông và các huyết thanh khác bằng cách làm lạnh an toàn vàkho. Sử dụng huyết thanh đã rã đông kịp thời. FBS lỏng và huyết thanh khác có thể được bảo quản trong tủ lạnh (2 đến 8 ° C)lên đến bốn tuần.